Помимо кариотипа, который показывает хромосомные нарушения на уровне клеток тела человека, имеются также исследования, которые выявляют хромосомные нарушения (анеуплоидия) в гаметах. Конкретно, мужчина, имеющий нормальный кариотип, может иметь хромосомные нарушения в сперматозоидах в результате ошибок в процессе мейоза при сперматогенезе.
Хромосомные нарушения (анеуплоидия) сперматозоидов и параметры спермограммы
Процент генетических нарушений даже в сперме фертильных мужчин составляет около 2-13%. Исследования показали, что этот процент выше у субфертильных мужчин.
Исследования также показали, что имеется связь между обычными параметрами спермы (концентрация, морфология и подвижность) и повышенным числом хромосомных нарушений, несмотря на то, что спермограмма зачастую не отражает уровня анеуплоидии в сперме.
Высокий уровень анеуплоидии в сперме и беременность
Исследования показывают, что высокий уровень анеуплоидии в сперме мужчин оказывает отрицательное влияние на наступление беременности и часто приводит к быстрым выкидышам в течение первых трех месяцев беременности.
Измерение процента анеуплоидии в сперме
Метод анализа, который применяется при проведении этого исследования – это флуоресцентная гибридизация in situ (известная также как метод FISH). В ходе этой процедуры используются специальные ДНК-зонды, которые гибридизируются в конкретных хромосомных зонах. Эти зонды имеют нуклеозиды, меченные флюорофорами, которые светятся при определенном излучении, что облегчает подсчет. Таким образом, каждая цветная метка соответствует хромосоме, с которой она «связана» (картинка 1).
КАРТИНКА 1. На картинке изображены головки сперматозоидов после их обработки с помощью метода FISH. Для анализа хромосом Χ, Υ и 18 были использованы ДНК-зонды с красным, зеленым и синим флюорофорами, соответственно.
Сперматозоид считается нормальным в том, что касается подвергшихся анализу хромосом, когда он имеет одну красную (x) и одну синюю метку (18) или одну зеленую (y) и одну синюю (18). Любое другое количество меток считается хромосомным нарушением.
Цветные метки (они представляют хромосомы) анализируются у тысяч сперматозоидов по каждому образцу спермы. К сожалению, этот метод имеет определенные пределы и до настоящего момента мы можем проанализировать 5 (конкретно 13-ю, 18-ю, 21-ю парe, а также хромосомы x и y, которые определяют пол) из 23 пар хромосом, имеющихся у человека.
О результатах этого исследования сообщается как о проценте дисомии и асомии в отношении исследуемых хромосом. Дисомия – это наличие дополнительной метки, а, следовательно, и хромосомы? и считается нарушением. То же самое имеет силу и в отношении асомии, в ходе которой не прослеживается метка, а, следовательно, и хромосома в анализируемом сперматозоиде. В результатах сообщается также о проценте сперматозоидов, которые имеют половую хромосому x или y. Анализ завершается примерно через две недели.
Кто мог бы воспользоваться вышеназванным генетическим исследованием? Пары с:
• повторяющимися выкидышами в течение первых трех месяцев беременности
• олигоастенотератоспермией супруга
• многочисленными неудачными попытками цикла искусственного воспроизводства (IVF/ICSI)
Каковы причины повышенного уровня анеуплоидии в мужской сперме
Причины повышенного уровня анеуплоидии в мужской сперме не известны полностью, некоторые показатели, которые могут способствовать этому явлению, следующие:
• химиотерапия - лучевая терапия
• хроническое воздействие факторов окружающей среды и токсических веществ
• воздействие ионизирующего излучения
• пожилой возраст отца